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“RobustCutter SUMO(ULP)蛋白酶”参数说明
| 类别： | 分子生物学工具酶 | 用途1： | 切割sumo融合蛋白 |
“RobustCutter SUMO(ULP)蛋白酶”详细介绍
概述：
SUMO蛋白酶 (SUMO Protease)，也称ULP蛋白酶，是一种高活性的半胱氨酸蛋白酶(1)，它能够高效地把SUMO (Small Ubiquitin-like Modifier) 从融合蛋白上切割下来。不同于大多数蛋白酶 (识别位点为氨基酸序列)，SUMO蛋白酶识别SUMO蛋白的三级结构，所以具有极高的特异性(2,3)。SUMO融合蛋白经SUMO蛋白酶切割后，无末端残留残基，可以获得具有自然氮末端的目标蛋白 (氮末端为脯氨酸的除外)(4)。SUMO蛋白酶的最适反应温度为30°C，可以在较为宽范围的反应体系 (温度4-30°C，pH 5.5-9.5) 中保持活性，并且对部分蛋白变性剂有一定的耐受能力(4) 。RobustCutter Sumo蛋白酶具有多聚组氨酸标签 (polyhistidine tag)，便于融合蛋白切割后的亲和层析纯化。
来源：
重组E. coli菌株，含有酿酒酵母Ulp1基因片段。
反应条件：
SUMO蛋白酶贮存液:25 mM Tris-HCl (pH 8.0 @ 25°C)，1% IGEPAL® CA-630 (NP-40), 250 mM NaCl，50 μM DTT，50% (v/v) 甘油。
10× SUMO Protease Buffer (Salt plus):500 mM Tris-HCl (pH 8.0 @ 25°C)，2% IGEPAL® CA-630 (NP-40)，1.5 M NaCl，10 mM DTT。
10× SUMO Protease Buffer (Salt free):500 mM Tris-HCl (pH 8.0 @ 25°C)，2% IGEPAL® CA-630 (NP-40)，10 mM DTT。
质保声明：
SUMO蛋白酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。
单位定义：
在30°C条件下反应1小时，切割100 μg的反应底物 (SUMO-eGFP) 达90%以上所需的酶量定义为一个活性单位。
参考文献:
1. Li, S.J. and Hochstrasser, M. (1999) Nature, 398, 246-251.
2. Müller, S., Hoege, C., Pyrowolakis, G. and Jentsch, S. (2001) Nature Rev. Mol.Cell Biol., 2, 202-210.
3. Mossessova, E. and Lima, C.D. (2000) Mol. Cell, 5, 865-876.
4. Panavas, T., Sanders, C., and Butt, T.R. (2009) Methods Mol. Biol., 497, 303-317.
SUMO蛋白酶 (SUMO Protease)，也称ULP蛋白酶，是一种高活性的半胱氨酸蛋白酶(1)，它能够高效地把SUMO (Small Ubiquitin-like Modifier) 从融合蛋白上切割下来。不同于大多数蛋白酶 (识别位点为氨基酸序列)，SUMO蛋白酶识别SUMO蛋白的三级结构，所以具有极高的特异性(2,3)。SUMO融合蛋白经SUMO蛋白酶切割后，无末端残留残基，可以获得具有自然氮末端的目标蛋白 (氮末端为脯氨酸的除外)(4)。SUMO蛋白酶的最适反应温度为30°C，可以在较为宽范围的反应体系 (温度4-30°C，pH 5.5-9.5) 中保持活性，并且对部分蛋白变性剂有一定的耐受能力(4) 。RobustCutter Sumo蛋白酶具有多聚组氨酸标签 (polyhistidine tag)，便于融合蛋白切割后的亲和层析纯化。
来源：
重组E. coli菌株，含有酿酒酵母Ulp1基因片段。
反应条件：
SUMO蛋白酶贮存液:25 mM Tris-HCl (pH 8.0 @ 25°C)，1% IGEPAL® CA-630 (NP-40), 250 mM NaCl，50 μM DTT，50% (v/v) 甘油。
10× SUMO Protease Buffer (Salt plus):500 mM Tris-HCl (pH 8.0 @ 25°C)，2% IGEPAL® CA-630 (NP-40)，1.5 M NaCl，10 mM DTT。
10× SUMO Protease Buffer (Salt free):500 mM Tris-HCl (pH 8.0 @ 25°C)，2% IGEPAL® CA-630 (NP-40)，10 mM DTT。
质保声明：
SUMO蛋白酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。
单位定义：
在30°C条件下反应1小时，切割100 μg的反应底物 (SUMO-eGFP) 达90%以上所需的酶量定义为一个活性单位。
参考文献:
1. Li, S.J. and Hochstrasser, M. (1999) Nature, 398, 246-251.
2. Müller, S., Hoege, C., Pyrowolakis, G. and Jentsch, S. (2001) Nature Rev. Mol.Cell Biol., 2, 202-210.
3. Mossessova, E. and Lima, C.D. (2000) Mol. Cell, 5, 865-876.
4. Panavas, T., Sanders, C., and Butt, T.R. (2009) Methods Mol. Biol., 497, 303-317.
